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实验室常用的核酸染料有哪几种

发布时间:2021-07-19   点击次数:128次
  在生物化学实验室中,小伙伴们经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧和具有爆炸性的化学药品直接接触,常常使用易碎的玻璃和瓷质器皿以及在煤气、水、电等高温电热设备的环境下进行着紧张而细致的工作,因此,必须十分重视安全工作。对于医学小伙伴而言,常接触到的就是核酸染料,下面小编为大家介绍几种常用的核酸染料
 
  实验室常用的核酸染料有以下几种:
 
  1.EB(溴化乙锭)
 
  EB(溴化乙锭)是高度灵敏的嵌入性芳香族荧光化合物,为强致癌诱变剂,但价格便宜,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。通常用于分子遗传学、DNA和染色质结构分析等研究中,特别是国内很多实验室仍在使用EB进行凝胶核酸电泳实验的染色。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性,在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子,常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。
 
  2.GoldViewI型/II型染料
 
  GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,也可用于RNA染色。
 
  注意:GoldView是一种剧毒产品,实验是一定要带好防护手套。
 
  3.GelRed和GelGreen
 
  美国biotium的GelRed/GelGreen属于大分子产品,经过埃姆斯AMS和相关测试,结果表明,该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB),是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的的荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。GelRed和GelGreen的特殊化学结构使其难以穿透细胞膜进入细胞,正是这一特性降低了染料的细胞毒性。不过也正是因为如此,其价格大约是GoldView的十倍左右。该染料是目前市场中较灵敏的凝胶核酸染料之一;稳定性好,可以使用微波炉加热,可以在室温下保存。适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色;染色过程简单,与EB一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解,而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗;对DNA和RNA的迁移影响小,对核酸迁移的影响小于SYBRGreenI;与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置很好兼容,使用312nm激发的UV凝胶成像系统时,GelRed可以替代EB,使用254nm激发的UV凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时,GelGreen足以替代任意一种SYB染料。但该染料会使小片段DNA迁移慢一些(与EB相比)。
 
  4.SYBRGreen和SYBRGold
 
  SYBR系列荧光染料于1995年由Molecularprobes公司推出,具有高灵敏性,其化学本质是一种非对称性花菁类化合物,与核酸具有极高的亲和力,自推出后在国外实验室备受推崇并在近几年得到广泛的应用。
 
  SYBR系列荧光染料稳定性差,也有毒性。它属于花箐素类核酸染料,花箐类染料不是无毒的,而只是低毒的,电泳级别的是经过修饰的,修饰有三种:1.加入卤素或氰基。2.插入环羟基。3.加入稳定剂。
 

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